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液基細胞粘附載玻片

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液基細胞粘附載玻片

發(fā)布日期:2017-01-09 00:00 來源:http://nz-crusher.com.cn 點擊:

防脫片又名粘附載玻片、離子潤飾玻片和細胞捕獲玻片等,是用化學或物理辦法進行載玻片或蓋玻片的外表潤飾,常用于細胞培育、病理學安排和細胞制片、液基細胞學薄層制片,以避免操作過程中細胞或安排掉片景象的發(fā)作。 產(chǎn)品規(guī)格:76x26mm,1~1.2mm,50片/盒 防脫片分類 防脫片可分為:通常防脫載玻片、離子潤飾玻片、正電荷玻片、負電荷玻片、醛化玻片、硅化玻片、氨基化玻片和細胞捕獲玻片等。而玻片載體可以用載玻片、蓋玻片、培育皿或培育瓶等。 防脫片成分 防脫片的成分為載玻片(蓋玻片)、玻片潤飾劑(黏附劑),常用的黏附劑有APES(3-Aminopropyl-Triethoxysilane 3-氨丙基-3-乙氧基甲硅烷)、多聚-L-賴氨酸(Poly-L-Lysine)、明膠、蛋清等。細胞學常用黏附劑為APES和多聚-L-賴氨酸 ,安排學常用明膠、蛋清等。 防脫片的運用 防脫片用于細胞培育、病理學安排和細胞制片、液基細胞學薄層制片,尤其是在液基細胞學薄層制片中防脫片的質(zhì)量至關(guān)重要,而多聚左旋賴氨酸為現(xiàn)在免疫安排化學染色中最常用的防脫片劑,適合于需要酶消化、微波、高溫高壓的防脫片處理。如效果欠安,可用兩層處理(APES和poly-l-lysine)的切片。在以上兩種辦法均無效的情況下,可用如下辦法:切片在脫蠟前放在APES l:50丙酮溶液中浸泡3分鐘,曬干后即可進行下一步驟。 現(xiàn)在在細胞培育、病理學安排和細胞制片、液基細胞學薄層制片的運用中,細胞捕獲玻片運用最廣,附著力強、粘附的細胞多。 防脫片常用制備辦法 一、載玻片和蓋玻片的處理 將載玻片或培育用的小蓋片浸泡在重鉻酸鉀濃硫酸清洗液中24小時,然后流水充分沖刷,再用蒸餾水沖刷3遍以上,而后置95%乙醇中12小時。取出擦干或烤干,貯放于玻片盒內(nèi)備用。蓋玻片很薄,以上處理程序有必要縮短時間,清洗液浸泡只需2小時,流水沖刷留神勿危害玻片。 二、常用黏附劑的運用 1.多聚左旋賴氨酸(poly-1-lysine) 首要制作0.1%(ω/υ)多聚左旋賴氨酸濃縮液,室溫下(18~26℃)可保存1年。運用時,將試劑10倍稀釋成工作液,濃度為0.01%(ω/υ),2-8℃冰箱保存,有效期3個月。運用辦法是將充分洗凈和預先單調(diào)的玻片浸泡于稀釋后的多聚左旋賴氨酸溶液數(shù)十秒或提拉十次,瀝干.于室溫下曬干12-24小時或在45℃以下烤箱內(nèi)烘干。處理后的玻片避光單調(diào)可保存三個月。 2.APES(3-氨丙基-乙氧基甲硅烷) APES有必要現(xiàn)用現(xiàn)配。用此辦法黏合的玻片應筆直烤片而不能水平烤片,不然,安排片中易出現(xiàn)氣泡。 APES的運用辦法:用丙酮50倍稀釋(APESl份、丙酮49份混合),將洗凈的玻片放人稀釋好的APES中,停留20~30秒,取出稍停,再人純丙酮或蒸餾水中涮去未結(jié)合的APES。置通風櫥中曬干即可。留神用APES防脫片處理的載玻片撈片時安排應一步到位.并盡量減少氣泡存在,避免影響染色成果。留神不要將APES與其他防脫片劑混合運用。

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